[1]唐军荣,谭辛夷,孙正海,等.金线莲ISSR-PCR反应体系建立[J].北方园艺,2014,38(18):118-122.
　TANG Jun-rong,TAN Xin-yi,SUN Zheng-hai,et al.Establishment of ISSR-PCR Reaction System for Anoectochilus roxburghii[J].Northern Horticulture,2014,38(18):118-122.

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金线莲ISSR-PCR反应体系建立

《北方园艺》[ISSN:1001-0009/CN:23-1247/S] 卷: 第38卷期数: 2014年18期页码: 118-122 栏目: 出版日期: 2014-09-30

Title:: Establishment of ISSR-PCR Reaction System for Anoectochilus roxburghii

文章编号:: 1001-0009（2014）18-0118-05

作者:: 唐军荣¹; 谭辛夷²; 孙正海²; 辛培尧¹; 1.西南林业大学国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室,云南昆明 650224；
2.西南林业大学园林学院，云南昆明 650224

Author(s):: TANG Jun-rong¹; TAN Xin-yi²; SUN Zheng-hai²; XIN Pei-yao¹; 1.Key Laboratory of Biodiversity Conservation in Southwest China,State Forestry Administration，Southwest Forestry University,Kunming，Yunnan 650224;
2.School of Horticulture and Gardening，Southwest Forestry University，Kunming,Yunnan 650224

关键词:: 金线莲; ISSR-PCR; 正交设计

Keywords:: Anoectochilus roxburghii; ISSR-PCR; orthogonal design

分类号:: Q 949.71+8.43

文献标志码:: A

摘要:: 利用正交设计L₁₆（45）对金线莲ISSR-PCR反应体系的5因素（模板DNA、Taq酶、引物、Mg2+和dNTP）在4个水平上进行优化试验，采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平。结果表明：最终建立的金线莲ISSR-PCR的最佳反应体系为，在25 μL的反应体系中，DNA模板为40 ng、Taq酶为1.60 U、引物浓度为0.80 mmol/L、dNTP浓度为0.96 mmol/L、Mg2+浓度为2.40 mmol/L。该反应体系的建立为金线莲种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法。

Abstract:: The orthogonal design was used to optimize ISSR-PCR amplification system on Anoectochilus roxburghii in four levels of five factors (DNA template，Taq DNA polymerase，primer，Mg²⁺，and dNTP)respectively.The results showed that a suitable ISSR-PCR reaction system was established，namely 25 μL reaction system containing 40 ng DNA template，1.60 U Taq DNA polymerase，0.80 mmol/L primer，0.96 mmol/L dNTP，2.40 mmol/L Mg²⁺.In conclusion，this established ISSR-PCR reaction system provide an available and reliable method for genetic diversity analysis and germplasm clssificatin of Anoectochilus roxburghii.

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备注/Memo

第一作者简介：唐军荣（1982-），男，广西全州人，硕士，讲师，现主要从事药用植物繁育等研究工作。E-mail:tjrzy@163.com.
责任作者：孙正海(1978-)，男，山东昌邑人，博士，副教授，现主要从事植物种质资源评价和采后保鲜及生物技术辅助育种等研究工作。E-mail:sunzhenghail978@163.com.
基金项目：云南省教育厅科学研究基金资助项目(2013Y123)。
收稿日期：2014-04-24

更新日期/Last Update: 2014-11-27