CHEN Chuanhong,GU Xiaobin,YING Jiaxuan,et al.Rapid Propagation of Disease-free Citrus sinensis Osbeck vc.Newhall Production Using Debacterization and Microshoot tip grafting in vitro[J].Northern Horticulture,2019,43(18):26-31.[doi:10.11937/bfyy.20184424]
赣南脐橙无菌苗生产的组培脱菌与微芽嫁接快繁技术
- Title:
- Rapid Propagation of Disease-free Citrus sinensis Osbeck vc.Newhall Production Using Debacterization and Microshoot tip grafting in vitro
- Keywords:
- Citrus sinensis Osbeck vc.Newhall; Citrus Huanglongbing; bud proliferation; heat treatment; microshoot tip grafting
- 文献标志码:
- A
- 摘要:
- 以柑橘良种赣南脐橙带芽茎段为外植体，枳壳无菌实生幼苗作为砧木，探讨了消毒灭菌方法、植物生长调节剂组合、热处理温度和时间及茎尖尺寸大小对其无菌体系的建立、丛生芽的诱导与增殖、脱菌及微嫁接的影响。结果表明：采用70%酒精消毒30 s，无菌水冲洗3次，再用 0.1%升汞加吐温-80消毒15 min，可获得成功率为83.20%的有生命力无菌培养材料；以MS+6-BA 1.0 mg?L-1+NAA 0.5 mg?L-1为最佳芽诱导培养基，诱导率达89.72%；最佳丛生芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg?L-1+NAA 0.4 mg?L-1+GA3 0.1 mg?L-1，增殖率最高达394.26%；采用40 ℃高温处理40 min的0.6 mm茎尖进行微嫁接，成活率为63.32%，脱菌率为93.21%。
- Abstract:
- The effects of disinfection and sterilization methods，plant growth regulator combination，heat treatment temperature and time，and the size of stem tip on the establishment of sterile system，induction and proliferation of cluster buds，debacterization and microshoot tip grafting were discussed for (Citrus sinensis (L.) Osbeck) in Gannan region.The results showed that 83.20% of the viable sterile culture materials could be obtained by sterilizing with 70% alcohol for 30 seconds，washing with sterile water for 3 times，and then sterilizing with 0.1% mercuric chloride and Tween-80 for 15 minutes.Taking MS+6-BA 1.0 mg?L-1+NAA 0.5 mg?L-1 as the optimal bud induction medium，the induction rate reached 89.72%.The best multiplication medium for cluster buds was MS+6-BA 2.0 mg?L-1+NAA 0.4 mg?L-1+GA3 0.1 mg?L-1，with the highest multiplication rate of 394.26%.The survival rate was 63.32% and the bacteria and virus-free rate was 93.21% when the stem tip of 0.6 mm was treated at 40 ℃ for 40 minutes.
参考文献/References:
[1]范国成，刘波，吴如健，等.中国柑橘黄龙病研究30年[J].福建农业学报，2009，24(2):183-190.[2]程春振，曾继吾，钟云，等.柑橘黄龙病研究进展[J].园艺学报，2013，40(9):1656-1668.[3]王圣通，鲍敏丽，许美容，等.黄龙病对纽荷尔脐橙果实品质的影响[J].广东农业科学，2015，42(14):74-77.[4]罗宏炼.柑橘黄龙病综合防控关键技术[J].河北果树，2017(3):53-54.[5]陈毅群，易龙，李双花，等.柑橘茎尖微嫁接脱毒技术研究进展[C].北京：中国植物病理学会2018年学术年会论文集，2018.[6]刘柏玲.柑橘黄龙病茎尖微芽嫁接脱毒及其PCR检测的研究[D].武汉:华中农业大学，2004.[7]邓才生，胡启灿，陈燕，等.柑桔组织培养与茎尖微芽嫁接试验初探[J].福建农业科技，2009(4):54-55.[8]吴思梦，刘冰，蒋军喜，等.柑橘品种茎段离体培养条件的优化及微芽嫁接试验[J].南方农业学报，2017，48(11):2034-2038.[9]陈国华，陈冬怡，马文卿，等.柑橘脱毒快繁及微芽嫁接技术试验研究[J].农业工程，2017(2):129-133.[10]蒋元晖，赵学源，苏维芳，等.通过茎尖嫁接脱除柑桔黄龙病病原体[J].植物保护学报，1987(3)：162,184.[11]张桂芳，贺红，徐鸿华.茎尖微嫁接技术脱除佛手病原体的研究[J].现代中药研究与实践，2010,24(2)：27-30.[12]SANABAM R，SINGH N S，HANDIQUE P J，et al.Disease-free khasi mandarin (Citrus reticulata Blanco) production using in vitro microshoot tip grafting and its assessment using DAS-ELISA and RT-PCR[J].Scientia Horticulturae，2015,189(23):208-213.[13]CHAND L，SHARMS S，DALAI R，et al.In vitro shoot tip grafting in citrus species-A review[J].Agricultural Reviews，2013，34(4):279-287.[14]金方伦，张发维，周光萍，等.纽荷尔脐橙在黔北地区的果实发育动态分析[J].北方园艺，2014(11):20-23.[15]王子成，李忠爱，邓秀新.柑橘成年态茎段外植体消毒方法研究[J].河南大学学报(自然科学版)，2005，35(2):61-64.[16]廖祥六，刘魁英，赵宗芸.柑桔微芽嫁接苗黄龙病的早期检测[J].安徽农业科学，2007，35(9):2578-2580.[17]刘柏玲，李国怀，程云清.茎尖嫁接脱除柑橘黄龙病病原及其检测方法比较[J].热带亚热带植物学报，2006,35(4):24-27.
备注/Memo
第一作者简介：陈传红（1973-），男，博士，副教授，现主要从事植物组织培养与湖泊生态学等研究工作。E-mail:cchuanhong@163.com.基金项目：国家自然科学基金资助项目（41562021）；江西省自然基金资助项目（20161BAB204191）；江西省教育厅科技计划资助项目（GJJ170438）。收稿日期：2019-03-19