TANGYan,XULong,WANGXin-jian,et al.MethodsforRNAIsolationfromFruitEndocarpofJuglansregiaL.[J].Northern Horticulture,2012,36(12):117-119.
核桃内果皮RNA提取方法研究
- Title:
- MethodsforRNAIsolationfromFruitEndocarpofJuglansregiaL.
- 文章编号:
- 1001-0009（2012）12-0117-03
- 分类号:
- S664.1；Q78
- 文献标志码:
- A
- 摘要:
- 以核桃果壳硬化期的内果皮为试材，针对核桃内果皮木质化程度高且富含多酚多糖的特点,比较CTAB法Ⅰ、CTAB法Ⅱ和试剂盒3种方法提取核桃内果皮RNA的效果。结果表明：3种方法提取的RNA均可见3条带。CTAB法Ⅰ提取的RNA略微拖带，OD-260/OD280为1.540，RNA产率为75.9μg/g，RNA完整性差，质量低；CTAB法Ⅱ的RNA图谱较完整，但亮度较弱,OD-260/OD-280为1.801，产率为86.1μg/g，但RNA提取过程耗时太长；试剂盒法提取的RNAOD-260/OD-280为2.055，RNA产率96.4μg/g，RNA图谱清晰、稳定、明亮，证明得到的RNA多糖及酚类等去除较彻底，纯度、完整性和产率均较高。因此，应用复杂植物总RNA提取试剂的试剂盒法可获得高质量与高产率的核桃内果皮总RNA，完全满足后续分子生物学研究。
- Abstract:
- JuglansregiaL.endocarpwereemployedasmaterialsinthisreport，becauseJuglansregiaL.endocarphadhighdegreeoflignificationandendocarpwererichinpolysaccharidesandpolyphenolcompounds，theperformancesofthreeextractionmethodsoftotalRNA：CTAB1，CTAB2andRNAplantReagentwerecomparedusingintheJuglansregiaL.endocarp.TheresultsshowedthatthetotalRNAisolatedbythreemethodshadthreebands.ThetotalRNAisolatedbythemethodofCTAB1hadtrailedbands，theOD-260/OD-280valueoftotalRNAwas1.540，theyieldwas75.9μg/g，theRNAintegralityandqualitywerefaulty.ThetotalRNAisolatedbythemethodofCTAB2hadintactbands，butitwascaliginous，theOD-260/OD-280valueoftotalRNAwas1.801，theyieldwas86.1μg/g，butthetimeofRNAisolationwasconsumed.TheOD-260/OD280valueofRNAisolatedbythemethodofRNAplantReagentwas2.055，theyieldwas96.4μg/g，threebandswereclean，steadyandbright，thatprovedthemethodcouldremovepolysaccharidesandpolyphenolcompoundscompletely，itcouldextracthighpurityandcompleteRNAatahighproductivity.ThetotalRNAisolatedbythemethodofRNAplantReagentwashighqualityandproductivity，themethodcompletelywasfitforfurtherbiologicalresearch.
参考文献/References:
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备注/Memo
第一作者简介：唐燕（1987-），女，在读硕士，现主要从事果树遗传育种研究工作。E-mail:422074689@qq.com。
责任作者：张锐（1979-），女，博士，副教授，现主要从事果树分子育种研究工作。E-mail：zhrgsh@163.com。
基金项目：兵团博士基金资助项目（2011BB006）。
收稿日期：2012-03-26