[1]王齐旭,冯诚诚,梁家作,等.四引物扩增受阻突变体系PCR在苦瓜抗白粉病分子标记开发中的应用[J].北方园艺,2018,42(05):39-46.[doi:10.11937/bfyy.20173923]
　WANG Qixu,FENG Chengcheng,LIANG Jiazuo,et al.Application of Tetra-primer ARMS PCR in Development of Molecular Markers for Powdery Mildew Resistance of Bitter Melon[J].Northern Horticulture,2018,42(05):39-46.[doi:10.11937/bfyy.20173923]
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四引物扩增受阻突变体系PCR在苦瓜抗白粉病分子标记开发中的应用

《北方园艺》[ISSN:1001-0009/CN:23-1247/S] 卷: 第42卷 期数: 2018年05 页码: 39-46 栏目: 出版日期: 2018-03-15
Title:
Application of Tetra-primer ARMS PCR in Development of Molecular Markers for Powdery Mildew Resistance of Bitter Melon
作者:
王齐旭1; 2; 冯诚诚2; 3; 梁家作2; 3; 陈小凤2; 3; 黄玉辉2; 3; 黄如葵2; 3
（1.广西大学 农学院，广西 南宁 530005；2.广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，广西 南宁 530005； 3.广西农业科学院 蔬菜研究所，广西 南宁 530005）
Author(s):
WANG Qixu1; 2; FENG Chengcheng2; 3; LIANG Jiazuo2; 3; CHEN Xiaofeng2; 3; HUANG Yuhui2; 3; HUANG Rukui2; 3
(1.Agricultural College，Guangxi University，Nanning，Guangxi 530005；2.Guangxi Crops Genetic and Improvement Biotechnology Lab，Nanning，Guangxi 530005；3.Vegetable Research Institute，Guangxi Academy of Agricultural Sciences，Nanning，Guangxi 530005)
关键词:
苦瓜; 引物设计; 四引物扩增受阻突变体系PCR; 体系优化; 筛选
Keywords:
bitter melon; primer design; tetra-primer ARMS PCR; system optimization; screening
DOI:
10.11937/bfyy.20173923
文献标志码:
A
摘要:
以苦瓜高抗、高感白粉病的父母本及其F2代为试材，根据双本测序比对获得的SNP突变位点来设计四引物ARMS PCR分子标记引物。采用正交设计L16（44）方法对模板DNA、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶4个因素和内外引物的浓度比进行体系优化，并利用优化后的体系对引物进行筛选。研究了适用于苦瓜的四引物ARMS PCR分子标记开发及引物筛选体系，以期为苦瓜抗白粉病分子标记辅助选择提供参考依据。结果表明：对优化后的四引物ARMS PCR体系验证，能正确地在父母本及其F2代中分型，优化后的体系适用于苦瓜抗白粉病的四引物ARMS PCR分子标记的筛选。
Abstract:
Parental lines with high bitter gourd resistance and susceptible powdery mildew and its F2 generation were used as test materials.The tetra-primer ARMS PCR molecular marker primers were designed according to the SNP mutation sites obtained by double-sequence sequencing.Orthogonal design L16(44) method was used to optimize the system of template DNA，dNTPs，Mg2 +，Taq  DNA polymerase and internal and outer-primer concentration ratio，and then the optimized system was used to screen the primers.The tetra-primer ARMS PCR molecular marker development were suitable for bitter melon and primer screening system were studied in order to provide reference for molecular marker-assisted selection of bitter melon-resistant powdery mildew.The results showed that the optimized the tetra-prime ARMS PCR system could be correctly typed in parents and their F2 generation and was suitable for the screening of the tetra-prime ARMS PCR molecular marker which was against powdery mildew.

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备注/Memo

第一作者简介：王齐旭（1990-），男，硕士研究生，研究方向为蔬菜遗传育种及生物技术。E-mail:377294317@qq.com. 责任作者：黄如葵（1969-），女，博士，研究员，现主要从事蔬菜育种与分子生物学等研究工作。E-mail:rkhuang@gxaas.net. 基金项目：现代农业产业技术体系专项资助项目（CARS-25）；“十二五”农村领域国家科技计划课题资助项目（2014BAD05B04-3）；国家自然科学基金资助项目（31760580）；广西科学研究与技术开发计划资助项目（桂科合15104003-1-1，桂科AB16380059）；广西自然科学基金资助项目（2015GXNSFBA139079）。收稿日期：2017-11-01

更新日期/Last Update: 2018-03-15