[J].Northern Horticulture,2012,36(12):113-116.
毛尖紫萼藓GH394基因克隆、表达载体的构建
- 文章编号:
- 1001-0009（2012）12-0113-04
- 分类号:
- Q348
- 文献标志码:
- A
- 摘要:
- 利用PCR技术，以毛尖紫萼藓总RNA为模板，扩增出上、下游分别加入BamHⅠ、SacⅠ酶切位点的GH394（657bp）基因CDS区全长序列，采用pMD18-TVector、pRI101-ANVector构建了该基因克隆、表达载体，并将重组载体质粒转化到大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5α和根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)工程菌株GV3101中，并选用X-gal、IPTG和利福平(Rifampicin，Rif)、卡那霉素（Kanamyein，Km）筛选阳性菌株。结果表明：已成功构建pMD-GH394克隆载体和pRI101-AN-GH394表达载体并将重组质粒转入目的菌株中；该试验为后续实现毛尖紫萼藓GH394基因抗旱预期功能的验证，奠定了良好的试验基础。
参考文献/References:
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备注/Memo
第一作者简介：张百成(1983-)，男，在读硕士，现主要从事植物遗传学研究工作。E-mail：baicheng359@163.com。
责任作者：沙伟(1963-)，女，博士，教授，博士生导师，现主要从事植物学与植物遗传学方面的研究工作。E-mail：Shw1129@263.net。
基金项目：国家自然科学基金资助项目（31070180）；齐齐哈尔大学研究生创新科研资助项目(YJSCX2010-010X)。
收稿日期：2012-04-09